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NEWSXPJ人P53 Elisa试剂盒说明书
来源:澹台胜民 日期:2025-03-20本试剂盒仅限用于科学研究,禁止用于医学诊断。XPJ P53 Elisa试剂盒的检测原理采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被了adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体,经过温育后彻底洗涤。然后使用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,随后在酸的作用下转变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样品浓度。
样品的收集、处理及保存方法如下:1. 血清样本:使用不含热原和内毒素的试管,避免在操作中产生细胞刺激。收集血液后,以3000转的速度离心10分钟,迅速分离血清与红细胞。2. 血浆样本:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清液。3. 细胞上清液:以3000转离心10分钟去除颗粒与聚合物。4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合捣碎,接着离心10分钟以获取上清液。5. 样品保存:若未能及时检测样本,应按单次使用量分装并冷冻于-20℃,避免反复冻融,并确保在室温下均匀充分解冻后再使用。
在试剂准备过程中,20×洗涤缓冲液需按1:20的比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加99份蒸馏水。根据标准品(S0-S5)的浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL进行操作。接下来,利用Excel绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,形成线性回归曲线,从而计算每个样本的浓度值。
免责声明:试剂盒的性能与准确性是根据严格验证的实际实验得出的,最终结果可能会受到操作方法、样本种类和处理条件的影响。
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