RAW2647细胞是一种经典的小鼠巨噬细胞系，因其易于培养和操作而成为科研工作者的重要工具。然而，在培养过程中，RAW2647细胞容易发生分化，从而导致细胞形态改变和功能下降，甚至影响实验结果的可靠性。如何保持RAW2647细胞的原始形态和功能，成为了科研人员关注的焦点。本文将为您揭示RAW2647细胞培养的黄金法则，助您轻松掌握这一细胞系。

细胞信息

倍增时间：11-30小时；因为RAW2647细胞生长快速，营养消耗也快，所以建议在T25培养瓶中添加7ml完全培养基，并次日观察其生长速度。

传代比例：1:4-6。

培养体系：使用DMEM高糖（品牌：中乔新舟，货号：ZQ-100）+10%胎牛血清（中乔新舟，货号：ZQ0500）+1%双抗（中乔新舟，货号：CSP006）进行培养。

细胞形态：该株巨噬细胞的形态可能呈现松散贴壁的纺锤形、圆形或立方形。当细胞密度较高时，细胞可能会轻微脱落、变圆，或者多个细胞堆在一起。漂浮的细胞为活细胞，在传代时应进行收集和离心，以便继续培养。

换液频率：每周2~3次。

正确传代方法

对于RAW2647细胞的培养，正确的传代方法至关重要。每一步操作都需小心谨慎，以免引起细胞分化。需要特别注意的是，RAW2647细胞不能使用胰酶消化，使用胰酶反而更容易导致细胞分化。我司经过十多年的经验累积，摸索出了一种刮刀传代的方法，该方法简单易行，能够更好地控制细胞分化率。为了便于学习传代步骤，我们录制了教学视频。若没有刮刀，可按照以下步骤进行传代：

1. 待细胞密度达到80%时，轻拍瓶尾部以观察细胞脱落情况。
2. 拍打过程中应有50-80%的细胞脱落，此时收集脱落的细胞。
3. 按1:4-6的比例进行传代，并补充新鲜的完全培养基（T25瓶中添加7ml）。
4. 切记，不要用枪头或巴氏吸管吹打细胞，因为不同的人吹打力度和次数不同，会导致不可控因素，进而影响细胞分化。

培养须知

在培养RAW2647细胞时，有几点需特别注意：

• 细胞传代时不需要使用胰酶消化，而是利用无菌细胞刮取培养表面以收集细胞，离心后重悬并接种到新培养瓶中。
• 细胞密度越高，圆形巨噬细胞的数量会增多。
• 细胞对血清质量极为敏感，选择高质量的胎牛血清至关重要。
• 培养条件、运输和环境变化等因素均会影响细胞状态，因此收到细胞后应给予一定的调整时间，请耐心培养。
• 建议使用本公司对应的培养基，以减少细胞培养过程中的变异。

复苏步骤

如果您需要复苏RAW2647细胞，请遵循以下步骤：

1. 从液氮中取出冻存的RAW2647细胞，迅速放入37℃水浴中解冻。
2. 将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中，轻轻混匀。
3. 以1000rpm离心5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬细胞（T25添加7ml）。
4. 将细胞接种于培养皿中，置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。

若您对传代密度控制或操作步骤仍有疑问，欢迎随时联系XPJ的销售人员或技术支持团队，我们将竭诚为您提供帮助！